Диагностика лабораторная больных с энтеровирусной инфекцией

Содержание
  1. Энтеровирусная инфекция
  2. Показания к обследованию
  3. Материал для исследований
  4. Анализ на энтеровирусную инфекцию: виды диагностики
  5. Основные методы диагностики
  6. Выявление антител
  7. Анализ кала
  8. Метод ПЦР
  9. Иммунофлуоресцентный метод
  10. Заключение
  11. Энтеровирусная инфекция (вирус Коксаки): симптомы, дифференциальная диагностика, лечение
  12. Этиология
  13. Патофизиология
  14. Ключевые диагностические факторы
  15. Диагностика
  16. Анамнез
  17. Физикальное обследование
  18. Лабораторное исследование
  19. Дифференциальная диагностика
  20. Лечение
  21. Симптоматическая терапия
  22. Пациенты с ослабленным иммунитетом или пораженные энтеровирусом типа 71 (EV71), или с осложнениями
  23. Обезвоживание
  24. Вторичная бактериальная инфекция
  25. Энцефалит или энцефаломиелит, ассоциированные с энтеровирусом типа 7
  26. Прогноз
  27. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций
  28. Риновирусы
  29. Афтовирусы

Энтеровирусная инфекция

Диагностика лабораторная больных с энтеровирусной инфекцией

Среди энтеровирусов (семейство Picornaviridae) на сегодняшний день насчитывается более 100 серотипов. Энтеровирусная инфекция широко распространена во всех регионах мира.

У человека энтеровирусная инфекция может протекать бессимптомно или сопровождаться широким спектром клинических проявлений: от легкого недомогания или диарейного синдрома до развития тяжелых заболеваний, таких как серозный менингит, паралич, миокардит, энтеровирусный сепсис новорожденных.

Более 90% случаев заболевания серозным менингитом имеют энтеровирусную этиологию. Энтеровирусы одного серотипа могут быть связаны с различными клиническими проявлениями, но в то же время энтеровирусы разных серотипов могут вызывать схожую симптоматику заболевания. Наиболее подвержены заболеванию дети младшего возраста.

Сезонный подъем заболеваемости в РФ – летне-осенний период. Циркуляция энтеровирусов может сопровождаться развитием вспышек заболевания. Диагностика энтеровирусной инфекции требует комплексной оценки клинической симптоматики заболевания, результатов лабораторных исследований и эпидемиологических данных.

К энтеровирусам относится вирус полиомиелита (полиовирус), имеющий особое эпидемиологическое значение в связи с проводимой ВОЗ Программой глобальной ликвидации полиомиелита. Острый полиомиелит характеризуется разнообразием клинических форм – от абортивных до паралитических.

Паралитические формы с развитием вялых и периферических парезов и/или параличей возникают при поражении вирусом серого вещества, расположенного в передних рогах спинного мозга и двигательных ядрах черепно-мозговых нервов. Благодаря интенсивной иммунизации против полиомиелита, циркуляция вирусов дикого типа прекращена в большинстве стран. В 2002 г.

Европейский регион, включая РФ, сертифицирован ВОЗ как свободный от вирусов полиомиелита дикого типа. Однако в рамках Программы во всех странах осуществляется эпидемиологический надзор за паралитическим полиомиелитом, а также за клинически схожим синдромом острого вялого паралича (надзор за ПОЛИО/ОВП).

В случае выявления больного с подозрением на ПОЛИО/ОВП медицинские работники организаций и частнопрактикующие медицинские работники обязаны руководствоваться действующей нормативно-методической документацией СП 3.1.2951-11.

Показания к обследованию

  • Наличие одного или нескольких клинических синдромов: очаговая неврологическая симптоматика, менингеальные симптомы, сепсис новорожденных небактериальной природы, ящуроподобный синдром (экзантема полости рта и конечностей), герпангина, афтозный стоматит, миокардит, геморрагический конъюнктивит, увеит, миалгия,
  • возникновение групповой заболеваемости в детском организованном коллективе при наличии таких синдромов, как респираторный, гастроэнтерит, экзантема и другие.

Материал для исследований

  • Стерильные типы материала: СМЖ (при наличии клинических показаний для проведения люмбальной пункции), отделяемое конъюнктивы, мазок отделяемого везикул, биоптаты органов;
  • нестерильные типы материала: мазок (смыв) из ротоглотки/носоглотки, мазок отделяемого язв при герпангине, образцы фекалий.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение энтеровируса в культуре клеток с последующей идентификацией, выявление РНК вируса.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Выделение изолята вируса из биологического материала позволяет с наибольшей информативностью изучать его свойства.

Для идентификации (определения серотипа) выделенного энтеровируса с целью изучения эпидемиологических аспектов инфекции используют иммунологический метод нейтрализации с помощью типоспецифических диагностических сывороток.

Культуральные исследования, характеризующиеся высокой трудоемкостью, в настоящее время применяются преимущественно в научно-исследовательских целях, их применение затруднено ограниченным набором типоспецифических диагностических сывороток.

Обнаружение РНК вируса методом ПЦР является более быстрым и доступным для практики подходом. Применение ПЦР также позволяет обнаружить РНК энтеровирусов, не размножающихся в культуре клеток.

Косвенные способы диагностики – оценка нарастания титров АТ в динамике заболевания не нашли широкого применения в диагностике энтеровирусной инфекции.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Выявление РНК вируса методом ПЦР предпочтительно при обследовании пациентов для лабораторной диагностики энтеровирусных заболеваний.

Выделение вируса в культуре клеток показано при реализации программ эпидемиологического мониторинга циркулирующих изолятов энтеровирусов.

В последние годы получает все более широкое распространение методов генетического типирования энтеровирусов.

Такие исследования проводятся в ограниченном числе референтных лабораторий и применяются в основном для решения задач эпидемиологического мониторинга.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение энтеровирусов или их РНК в стерильных типах биологического материала (СМЖ, отделяемое везикул) имеет высокую диагностическую значимость.

Выявление энтеровирусов или их РНК в нестерильных типах биологического материала (фекалии, респираторные мазки) часто не имеет этиологической связи с диагностируемым заболеванием, в связи с высоким уровнем их бессимптомного носительства в популяции.

Недопустимо подтверждение или исключение диагноза энтеровирусной инфекции, сопровождающейся любой неврологической симптоматикой, на основании результатов исследования нестерильных типов клинического материала.

Для установления энтеровирусной инфекции с менингеальной симптоматикой должны учитываться только результаты исследования СМЖ. К сожалению, в действующей нормативно- методической документации СП 3.1.2950-11 данный основополагающий принцип интерпретации отражения не нашел.

Рекомендации по интерпретации результатов лабораторных исследований изложенные в МУ 3.1.1.2363-08 по этой причине являются более приемлемыми для клинической практики.

При наличии специфической для некоторых форм энтеровирусной инфекции симптоматики (ящуроподобное заболевание, острый геморрагический конъюктивит, увеит и др.) интерпретация результатов исследования нестерильных типов клинического материала должна проводиться с учетом эпидемиологических и клинических данных.

Выявление энтеровирусов или их РНК в образцах фекалий и материале из рото/ носоглотки у пациентов со спорадической заболеваемостью не может служить основанием для подтверждения этиологии не только серозных менингитов, но и заболеваний верхних дыхательных путей, диарейных инфекций и лихорадочных заболеваний неясной этиологии, вследствие высокой частоты транзиторного носительства энтеровирусов в популяции.

Выявление энтеровирусов или их РНК в нестерильных типах клинического материала может служить подтверждением энтеровирусной инфекции при проведении исследований в ходе вспышки и при наличии у пациента характерной для нее клинической картины заболевания, а также в отсутствие вспышки, но при соответствии идентифицированного вируса специфичной клинической картине.

Источник: https://www.cmd-online.ru/vracham/spravochnik-vracha/enterovirusnaya-infektsiya/

Анализ на энтеровирусную инфекцию: виды диагностики

Диагностика лабораторная больных с энтеровирусной инфекцией

Анализ на энтеровирусную инфекцию является одним из распространенных лабораторных методов в силу частого заражения этим возбудителем. Для уточнения диагноза используются различные способы диагностики.

Основные методы диагностики

Чтобы подтвердить диагноз энтеровирусной инфекции, применяют методы лабораторной диагностики: специфические вирусологические методики.

Инфекцию может вызвать содержащий рнк энтеровирус или семейство аденовирусов, которые поражают как слизистую оболочку кишечника, так и ткани верхних дыхательных путей, глаз. По этой причине материалом для исследования является не только кал, но и смывы с носоглотки и конъюнктивы.

Если подозревается энтеровирусная инфекция, диагностика проводится в первые дни от начала заболевания, когда концентрация вирусов является наибольшей.

Чтобы дифференцировать инфекцию применяются такие серологические методы:

  • определение иммуноглобулинов к вирусу;
  • выделение аденовирусов в кале;
  • ПЦР-диагностика;
  • иммунофлуоресцентный метод.

Особенностью при инфицировании аденовирусной инфекцией является длительное выделение возбудителя и вирусоносительство после исчезновения симптомов болезни. По этой причине через 2-3 недели после заболевания обследование необходимо повторить, что важно для профилактики повторного заражения в коллективе. Инфицированию больше подвержены дети в возрасте до 14 лет.

Выявление антител

Определение антител (иммуноглобулинов) к аденовирусам проводится методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Такая диагностика основана на способности организма вырабатывать защитные белки (антитела, иммуноглобулины) в ответ на заражение.

С помощью специально подобранных реактивов можно определить наличие антител к определенному типу возбудителя. Кроме диагностики аденовирусной инфекции в целом, можно определить серотип возбудителя.

Для сдачи анализа в стерильную емкость набирается венозная кровь. Забор материала необходимо проводить натощак, а интервал после приема пищи должен быть не меньше 8 часов. За 24 часа до исследования нельзя принимать алкоголь. Для профилактики искажений результата не стоит проводить анализ после физиотерапевтических процедур, флюорографии и других рентгенологических исследований.

Позитивный результат подтверждается наличием иммуноглобулинов класса IgG. Эти антитела образуются в крови человека разу после заражения, а в периоде острой фазы болезни концентрация их резко повышается.

Метод парных сывороток – это диагностический способ определить острую фазу энтеровирусной инфекции в течение первых 2-х недель от заражения. Для этого исследуется динамика нарастания концентрации антител с интервалом от 10 дней до 2 недель. В случае значительного роста подтверждается наличие свежей инфекции. Чувствительность такого метода составляет 90%.

Кроме того, рост IgG отмечается при реактивации латентной инфекции. По мере выздоровления концентрация антител в крови падает, но они циркулируют еще продолжительно время, указывая на перенесенную инфекцию.

Стойкого иммунитета к энтеровирусной инфекции нет, а при повторном заражении отмечается повторный стремительный рост специфических IgG.

Анализ кала

Энтеровирусы и аденовирусы вызывают кишечные формы заболевания или по мере развития инфекции она распространяется на слизистую оболочку кишечника, вызывая характерные симптомы.

Из-за недостаточного выполнения норм личной гигиены инфекцией чаще заражаются маленькие дети, у которых распространенным путем передачи является фекально-оральный.

К высокой температуре, явлениям катара верхних дыхательных путей и конъюнктивита присоединяется учащенное испражнение. Больного беспокоит диарея, водянистый светлый кал, боли в животе.

Такие симптомы являются показанием для лабораторной диагностики энтеровируса. Исследование необходимо проводить не позже 3 – 5 дня после появления симптомов. Через неделю болезни концентрация энтеровируса в кале уменьшается, что может снижать качество диагностики.

Тем не менее после выздоровления переболевший является источником инфекции, так как отмечается вирусоносительство, а возбудитель продолжает выделяться с калом.

Анализ также проводится для выделения конкретного возбудителя – для человека патогенными считаются несколько серотипов вируса.

Перед сдачей анализа необходимо помочиться, чтобы исключить попадание мочи в исследуемый материал. Для диагностики необходим свежий стул не более 15 г. Его набирают в специальный контейнер. Анализ должен пройти лабораторную диагностику не позже чем через 3 часа после забора материала.

Перед сбором кала нельзя применять любые препараты, влияющие на работу кишечника (слабительные или закрепляющие), а также делать клизмы. Прием дополнительных препаратов накануне забора материала, примеси мочи или других биологических жидкостей могут повлиять на конечный результат, сделав его недостоверным.

Результатом диагностики является положительный или отрицательный ответ. В первом случае врач может подтвердить диагноз и приступить к целенаправленному лечению болезни. В случае негативного результата, но при продолжающихся симптомах необходимо повторное проведение исследования.

Метод ПЦР

Диагностика энтеровирусной инфекции современной методикой цепной полимеразной реакции является одним из наиболее достоверных и быстрых способов.

Этот тест основан на обнаружении вирусной ДНК в крови человека или мазке из зева. С его помощью возможна как диагностика острых форм болезни, так и определение вирусоносительства.

Анализ на энтеровирус методом ПЦР является “золотым стандартом” вирусологической диагностики. Этим способом проводится дифференциальная диагностика энтеровирусной инфекции.

Больной не нуждается в специальной подготовке, однако перед забором материала необходимо следовать некоторым правилам:

  • исследование рекомендовано проводить натощак и с интервалом не менее 8 часов после еды;
  • желательно не принимать какие-либо препараты за сутки до сдачи крови;
  • отказ от приема алкоголя за день до исследования и курения не менее чем за час до забора крови;
  • отказ от физических и психических перенапряжений накануне диагностики;

Нежелательно осуществлять забор крови после физиотерапевтического лечения или инструментальных исследований. В случае проведения биопсии следует сделать паузу на несколько дней.

Если доктор назначил проведение повторного лабораторного исследования, желательно делать это в одинаковых условиях: в той же лаборатории, в одно и то же время.

Иммунофлуоресцентный метод

Метод иммунофлюоресценции основан на реакции со специальными реагентами, которые помечены красителем. Он применяется в рамках ранней диагностики энтеровирусной инфекции. Для исследования проводят соскоб со слизистой носа.

При определении энтеровирусов в организме человека во время микроскопии мазок подсвечивают ультрафиолетовыми лучами. Этот метод является способом экспресс-диагностики инфекции.

Специальные реактивы содержат антитела против энтеровирусов. При связывании антигенов и антител образовавшиеся комплексы становятся хорошо видимыми в ультрафиолетовом свете.

Такой тест имеет три разновидности:

  • прямой;
  • непрямой;
  • конкурентный.

Для проведения прямого способа диагностики к материалу анализа добавляют люминесцентный реактив. Образовавшиеся комплексы рассматривают через флуоресцентный микроскоп. При том анализе определяют наличие вирусных антигенов.

Тест при непрямой реакции определяет наличие антител в собранном материале. Реагентом выступает специальный антиген, который взаимодействует с антителами, выработанными в организме человека.

При конкурентном способе исследуют наличие вирусных антигенов. Отличие способа состоит в добавлении двух реагентов: антител и специальных меченых антигенов, которые конкурируют в реакции связывания.

Заключение

Точное диагностирование энтеровирусной инфекции необходимо для дифференциального диагноза и правильного назначения терапии. Современные методы позволяют сделать это быстро и качественно.

Источник: https://nashainfekciya.ru/virus/entero/analiz-na-enterovirusnuyu-infekciyu.html

Энтеровирусная инфекция (вирус Коксаки): симптомы, дифференциальная диагностика, лечение

Диагностика лабораторная больных с энтеровирусной инфекцией

Распространенная среди детей вирусная инфекция, которая, чаще всего, вызвана вирусом Коксаки, характеризующаяся субфебрильной температурой, мучительными язвами во рту и везикулами на руках и ногах.

Обычно инфекция возникает спорадически, однако вспышки могут случаться во всем мире. Вирус Коксаки крайне контагиозен. Инфекция поражает в равной степени как мужчин, так и женщин, но чаще встречается у детей младше 10 лет. Однако инфекция также может поражать старших детей, подростков и взрослых.

Эпидемии, вызванные более вирулентными штаммами энтеровирусов типа 71, чаще всего возникали в странах Восточной и Юго-Восточной Азии, например, в Тайване и Малайзии. Эти случаи имели тяжелое течение и часто были связаны с высокой заболеваемостью и смертностью.

Этиология

Наиболее часто встречается и вызывает заболевание группа энтеровирусов, которые известны как вирусы Коксаки. Вирус Коксаки А16 является наиболее частым возбудителем, однако встречаются и случаи инфицирования вирусами от А4 до А7, А9 и А 10. Энтеровирус типа 71 (EV71) также вызывает это заболевание, но она протекает более тяжело. Однако, EV71 инфекция не характерна для США и Европы.

Энтеровирусы являются икосаэдрическими безоболочечными вирусами, диаметр которых составляет около 30 нм. Геном образуется из одноцепочечной линейной молекулы РНК. Энтеровирусы устойчивы к действию липидных растворителей и переносят широкий диапазон рН и температур. Они инактивируются при температуре свыше 50 ° C (> 122 ° F), но остаются заразными при низкой температуре.

Патофизиология

Заражение происходит, когда уязвимый человек подвергается воздействию вируса путем прямого контакта с выделениями из носа и горла, слюной, жидкостью везикул или фекалиями зараженного человека. Вирус может оставаться активным в фекальном материале в течение 1 месяца.

После контакта вирус проникает в регионарные лимфатические узлы в течение 24 часов, и быстро наступает виремия вместе с распространением вируса на слизистую оболочку полости рта и кожу, возникает везикулярная сыпь.

Инкубационный период составляет от 4 до 7 дней однако, может также наблюдаться продромальный период от 3 до 4 дней. Язвы во рту заживают в течение 1 недели, а поражения на руках и ногах могут оставаться до 10 дней.

Ключевые диагностические факторы

  • Наличие факторов риска: иммуносупрессия, возраст младше 10 лет, контакты с инфекцией в пределах семьи или образовательного учреждения.
  • Субфебрильная лихорадка
  • Ротоглотка воспалена, язык, глотка, слизистая оболочка полости рта, десны, а иногда и губы, усеяны папулами, макулами, везикулами или, достаточно часто, желтоватыми язвами, слизистая оболочка под которыми эритематозная. Поражения заживают через 1 неделю.
  • Сыпь и/или везикулы на руках и ногах: Сыпь представляет собой маленькие овальные или линейные серо-белые везикулы пустулы. Везикулы (пузырьки) являются мягкими и тонкостенными с эритематозным ореолом. Они могут время от времени быть болезненными или чесаться. Везикулы, как правило, изъязвляются, после чего покрываются коркой. Поражения могут длиться до 10 дней.

Диагностика

Заболевание преимущественно длится всего несколько дней и проявляется в виде лихорадки и относительно легкой степенью симптомов. Диагноз обычно устанавливается клинически с учетом типичного анамнеза и характерных клинических признаков.

Проведение исследований обычно не оправдано, за исключением возможного инфицирования энтеровирусом типа 71 (EV71). EV71 вызывает более тяжелое течение заболевания и требует большей бдительности для своевременного выявления осложнений.

Анамнез

В большинстве случаев у пациентов в возрасте младше 10 лет внезапно начинается субфебрильная температура, потеря аппетита, боль в горле, кашель, боль в брюшной полости, диарея и общая слабость. Артралгия возникает лишь время от времени.

Продромальный период может длиться от 3 до 4 дней, после которого обычно возникает боль в области слизистой оболочки ротовой полости. Сыпь на ладонях рук и подошвах ног, а также на ягодицах может появиться через 1 или 2 дня. Заболевание может сопровождаться всеми вышеперечисленными признаками и симптомами или только некоторыми из них.

Физикальное обследование

Ротоглотка воспалена, язык, глотка, слизистая оболочка полости рта, десны, а иногда и губы усеяны папулами, макулами, везикулами или язвами, слизистая оболочка под которыми гиперемирована.

В случае, если ребенка вовремя не осмотреть, будут наблюдаться лишь желтоватые язвы, поскольку везикулы имеют свойство довольно быстро разрываться. Размеры язвы колеблются в пределах от 4 до 8 мм и могут иметь четкую кайму.

Поражения, как правило, не распространяются на мягкое небо, генерализованное изъязвление в ротовой полости не характерно.

Также могут возникать эритема или отек языка. Обычно возникает периферическая сыпь на ладонях и подошвах в виде небольших овальных или линейных серо-белых везикул-пустул.

Везикулы (пузырьки) являются мягкими и тонкостенными с эритематозным ореолом. Они могут время от времени быть болезненными или чесаться. Везикулы, как правило, изъязвляются, после чего покрываются коркой.

Поражения заживают через 1 неделю.

Макулопапулезная сыпь может наблюдаться на ягодицах у младенцев и маленьких детей, но обычно сыпь не изъязвляется. У детей младшего возраста часто наблюдаются все признаки и симптомы, в то время как старшие дети могут иметь только поражения в ротовой полости или периферические язвы.

Лабораторное исследование

Лабораторные анализы могут быть необходимы и полезны, если подозревается инфицирование энтеровирусом типа 71, например, у тех, кто недавно путешествовал в страны Восточной или Юго-Восточной Азии.

Для того чтобы идентифицировать вирус, лучше провести бактериологическое исследование кала или везикулярной жидкости, а также может быть использован мазок из глотки / ротоглотки. Вирус Коксаки А16 и энтеровирус типа 71 можно быстро различить путем проведения ПЦР, однако такие анализы еще не получили широкого распространения.

ОАК не стоит выполнять каждый раз, но если такой анализ проведен, то он покажет повышенный уровень лейкоцитов и атипичные лимфоциты.

Исследование
Вирусологическое исследование
  • Проводится только в случае подозрения на контакт с энтеровирусом типа 71 (EV71) (например, пребывание в странах Восточной или Юго-Восточной Азии).
  • Проводится бактериологическое исследование кала или везикулярной жидкости, также может быть использован мазок из глотки / ротоглотки.
Развернутый анализ крови
  • Проводится только в случае подозрения на контакт с энтеровирусом типа 71 (EV71) (например, пребывание в странах Восточной или Юго-Восточной Азии).
ПЦР молекулярные анализы
  • Можно использовать для выявления инфекций типа EV71.

Дифференциальная диагностика

ЗаболеваниеДифференциальные признаки/симптомыДифференциальные обследования
  • Афтозный стоматит или афтозные язвы в полости рта
  • Язвы наблюдаются на слизистой оболочке ротовой полости.
  • Ребенок соматически здоров, при этом лихорадка, слабость или сыпь не наблюдались.
  • Диагноз устанавливается клинически
  • В большинстве случаев наблюдается высокая температура, которая составляет >38 ° C (> 100,4 ° F).
  • Присутствуют острый гингивит и широко распространенные оральные изъязвления. • На коже наблюдаются маленькие и овальные везикулы, сгруппированные локально, кожа под которыми гиперемирована.
  • Обычно сыпь на ладонях или подошвах отсутствует, однако дети младшего возраста, которые сосут пальцы рук или ног, могут иметь поражения на 1 или 2 пальцах.
  • При пробе Тцанка с использованием жидкости из везикул выявляют многоядерные гигантские клетки.
  • Также можно провести прямой флюоресцентный тест на антигены в целях выявления вируса простого герпеса.
  • Эти исследования назначаются редко, поскольку диагноз обычно может быть установлен клинически.
  • Отмечается шейная лимфаденопатия, а также наблюдаются язвы на мягком небе.
  • Обычно сыпь не определяется.
  • Диагноз устанавливается клинически.
  • Сыпь, как правило, ограничивается участком туловища и конечностей и характеризуется сильным зудом. Типичное поражение выглядит как круглая везикула на гиперемированной коже, из которой впоследствии формируется пустула.
  • Прямой флуоресцентный тест на антигены для выявления вируса ветряной оспы.

Лечение

Заболевание, как правило, протекает в легкой степени и проходит самостоятельно в большинстве случаев при проведении поддерживающей терапии. Основной целью является облегчение боли, а также обеспечение поддержания гидратации и питания. Обычно поражения исчезают через 10 дней.

Симптоматическая терапия

Для снижения температуры и уменьшения боли могут быть использованы обычные пероральные анальгетики и жаропонижающие средства, например, парацетамол и ибупрофен. Аспирин не рекомендуется принимать при лихорадке из-за ассоциации с синдромом Рея. Местные анестетики (например, лидокаин) также могут помочь облегчить боль от язв во рту.

Поражения в ротовой полости могут быть болезненными, изза чего могут возникать трудности при пероральном приеме жидкости. Для детей, у которых наблюдается обезвоживание от средней до тяжелой степени, может потребоваться проведение внутривенной гидратации.

Пациенты с ослабленным иммунитетом или пораженные энтеровирусом типа 71 (EV71), или с осложнениями

Осложнения встречаются редко. К осложнениям, которые могут возникнуть при инфекции типа 71, относятся асептический менингит, энцефалит, энцефаломиелит, отек легких, легочное кровотечение, миокардит и смерть.Этим пациентам потребуется госпитализация и поддерживающее лечение осложнений.

У пациентов с ослабленным иммунитетом симптомы могут быть более тяжелыми и пролонгированными, но, согласно результатам одного случая, существуют доказательства того, что инфекция отвечает на пероральный прием ацикловира.

Обезвоживание

Связано с уменьшением потребления жидкости, которое развивается вторично из-за болезненных язв во рту. Необходимо обеспечить адекватное восстановление потерянной жидкости в организме (пероральное или внутривенное), в зависимости от возраста пациента и его клинического состояния.

Вторичная бактериальная инфекция

У пациентов с локализованным или диффузным распространением эритемы кожи и / или постоянной лихорадкой следует оценить возможное наличие инфекции и рассмотреть вопрос об эмпирической пероральной антибиотикотерапии.

Энцефалит или энцефаломиелит, ассоциированные с энтеровирусом типа 7

Инфекции типа EV71 могут привести к указанным осложнениям. Острое или подострое начало заболевания с лихорадкой, нарушения психического состояния, очаговые неврологические нарушения и судороги позволяют заподозрить такое заболевание. Пациент должен быть госпитализирован для проведения симптоматического и поддерживающего лечения.

Прогноз

Спонтанное выздоровление без осложнений является нормой, поэтому в дальнейших наблюдениях обычно не возникает необходимости.

Однако инфекции, вызванные энтеровирусом типа 71, которые чаще возникают в странах Восточной и Юго-Восточной Азии, приводили к более тяжелому течению заболевания с высокой заболеваемостью и смертностью; одно тайваньское исследование обнаружило, что у 4% пациентов наблюдались длительные остаточные явления, а смерть наступила у 8% пациентов.

  • Alsop J, Flewett TH, Foster JR. «Hand-foot-and-mouth disease» in Birmingham in 1959. Br Med J. 1960;2:1708-1711.
  • Ishimaru Y, Nakano S, Yamaoka K, et al. Outbreaks of hand, foot, and mouth disease by enterovirus 71. High incidence of complication disorders of central nervous system. Arch Dis Child. 1980;55:583-588.
  • Dolin R. Hand-foot-and-mouth disease. In: Freedberg I, ed. Fitzpatrick’s dermatology in general medicine. 6th ed. New York, NY: McGraw-Hill; 2003:2049-2052.
  • Weston WL, Lane AT, Morelli JG. Color textbook of pediatric dermatology. 3rd ed. St Louis, MO: Mosby Inc.; 2002:108-109.
  • Chang LY, Tsao KC, Hsia SH, et al. Transmission and clinical features of enterovirus 71 infections in household contacts in Taiwan. JAMA. 2004;291:222-227.
  • Chang LY, Lin TY, Huang YC, et al. Comparison of enterovirus 71 and coxsackie-virus A16 clinical illnesses during the Taiwan enterovirus epidemic, 1998. Pediatr Infect Dis J. 1999;18:1092-1096.
  • Zhu FC, Meng FY, Li JX, et al. Efficacy, safety, and immunology of an inactivated alum-adjuvant enterovirus 71 vaccine in children in China: a multicentre, randomised, double-blind, placebocontrolled, phase 3 trial. Lancet. 2013;381:2024-2032.
  • BMJ

Источник: https://www.eskulap.top/infekcionnye-bolezni/jenterovirusnaja-infekcija-u-detej-simptomy-profilaktika-lechenie/

Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций

Диагностика лабораторная больных с энтеровирусной инфекцией

Лабораторнаядиагностика энтеровирусных инфекцийпроводится путем выделения вируса изорганизма больного, а также по нарастаниютитра вирусспецифических антител.

Вирусы выделяют из фекалий, крови, смывовносоглотки и другого материала взависимости от периода заболеванияодновременно на первичных и перевиваемыхкультурах клеток, а также путем заражениямышей-сосунков.

Для идентификации вирусаприменяется реакция нейтрализации.

Гемагглютинирующиеварианты вирусов ECHO и Коксаки можноидентифицировать с помощью РТГА, которая,подобно реакции вируснейтрализации,характеризуется типоспецифичностью.

Выделениеэнтеровирусов из организма бoльнoгoособенно из фекальных масс, не являетсяабсолютным основанием для постановкидиагноза, учитывая распространениебессимптомного носительства.

Поэтомунеобходима серологическая диагностикас использованием парных сывороток,взятых в первые дни и на 2—3-й неделепосле начала заболевания.

В положительномслучае отмечается нарастание титраантител во второй сыворотке не менеечем в 4 раза в реакциях нейтрализации,РСК, РТГА.

Риновирусы

Этагруппа вирусов впервые была выделенав 1960 г. от людей, больных острымринитом.

Вирионыриновирусов имеют сферическую форму икубический тип симметрии, достигая20—30 нм в диаметре. Они похожи наэнтеровирусы, но в отличие от них теряютсвои инфекционные свойства в кислойсреде. Хорошо сохраняются при низкихтемпературах.

Длякультивирования риновирусов используюткультуру клеток, приготовленную изфибробластов легких эмбриона человекаили эпителия трахеи человека и хорьков.В оптимальных условиях культивированияпроявляется ЦПД.

Выделено113 серотипов риновирусов, многие изкоторых имеют идентичные антигены,ответственные за перекрестныесерологические реакции. Они не обладаютгемагглютинирующими свойствами.

Патогенеззаболеваний человека и иммунитет.Заражениепроисходит воздушно-капельным путем.Риновирусы локализуются в эпителиальныхклетках слизистой оболочки носа, а удетей — и бронхов, вызывая насморк,бронхиты и бронхопневмонии.

Послезаболевания сохраняется непродолжительныйиммунитет, который определяется нестолько сывороточными антителами,сколько секреторными иммуноглобулинамитипа IgA. Специфическая профилактика неразработана.

Лабораторнаядиагностика основана на выделениивируса в чувствительных культурахклеток. Для экспресс-диагностикиприменяется иммунофлюоресцентныйметод, который позволяет обнаружитьвирусный антиген в цитоплазме эпителиальныхклеток слизистой оболочки.

Афтовирусы

Кроду афтовирусов относится вирус ящура— возбудитель высококонтагиозногозаболевания парнокопытных домашнихживотных, вирусная природа которогобыла установлена еще в 1898 г. Ф. Леффлероми П. Фрошем. Вирус ящура мало чем отличаетсяот других пикорнавирусов. Существует7 серотипов вируса яищфа, отличающихсядруг от друга типоспецифическимиантигенами.

Патогенеззаболеваний человека. Вирусрепродуцируется в средних слоях эпителиякожи и слизистых оболочек. Затем проникаетв кровь, вызывая вирусемию. При этомможет произойти поражение миокарда ипаренхиматозных органов.

Послеперенесения заболевания сохраняетсянепродолжительный типоспецифическийиммунитет (около 1 —1,5 лет).

Экологияи распространение.Источникоминфекции являются больные животные.Человек заражается главным образом приуходе за ними, реже — при употреблениив пищу зараженных продуктов (сырогомолока и мяса) без достаточной термическойобработки.

Вирусящура в течение 2 мес сохраняется внекоторых пищевых продуктах (масле,жирах), а также в сгустках крови и костноммозге погибших животных.

Лабораторнаядиагностика.Исследуемыйматериал (содержимое везикул) вводитсяв кожу стопы морской свинки. Через 24—48ч в месте введения, а также в полостирта появляются везикулы. Вирус можновыделить в культуре клеток. Серодиагностикупроводят в реакции вируснейтрализациии РСК с парными сыворотками.

Дополнительные  материалыпо лабораторной диагностике энтеровируснойинфекции

Кишечныевирусы (энтеровирусы) человека входятв род Enterovirus семейства Picornaviridae.К ним отно­сятся вирусы полиомиелита(3 серотипа), Коксаки А (24 серотипа),Коксаки В (6 серотипов), ECHO (34серотипа) и энтеровирусы человека69—72-го сероти­пов.

Энтеровирус 70вызывает острый геморрагическийконъюнктивит, энтеровирус 72 — вирусгепатита А. В род Enterovirus входяттакже кишечные вирусы животных (крупногорогатого скота, обезьян, свиней, мышей)и насекомых.

Энтеровирусы животныххарактеризуются видовой специфичностью.

Обратитевнимание: Коксаки А 23 идентичен ЕСНО9.  ЕСНО 28 отнесен к риновирусам,ЕСНО 34 – вариант Коксаки А 24

Энтеровирусывызывают у человека поражение цент­ральнойнервной системы (энцефалит, менингоэнцефалит,полиомиелит, менингит), желудка и кишок(диарея, гепатит, панкреатит), а такжедыхательных путей (ри­нит, фарингит,пневмония новорожденных и др.

),сердечно-сосудистой системы (миокардит,перикардит). Возможно также развитиегерпетической ангины, экзан­темы,везикулярного стоматита, миалгии иконъюнкти­вита.

Различные энтеровирусымогут обусловливать одинаковыеклинические проявления, в то же времяодин энтеровирус способен привести кразвитию разных кли­нических синдромов.

Материаломдля исследования служат фекалии, смы­выс носовой части глотки, спинномозговаяжидкость, кровь, сыворотка, содержимоевезикул, моча, асцитическая жидкость.

От трупа берут на исследование кровь,спинномозговую жидкость, ткань спинногои продолго­ватого мозга, варолиевамоста, кусочки кишок и их содержимое,кусочки печени, селезенки, легкого,подже­лудочной железы, миокарда,лимфатические узлы.

Ма­териал берутв первые часы болезни, от трупа — непозднее чем через 3—4 ч после смерти.

Кровь(около 10 мл) для вирусологическогоанализа и приготовления сыворотки берутнатощак в начале болезни, а затем спустя3—4 недели.

Фекалии(4—6 г) собирают с интервалом 1—2 дня(можно использовать флаконы из-подантибиотиков).

Готовят 10 % суспензию врастворе Хенкса, встряхивают и осветляютцентрифугированием в течение 30 мин при3000 об/мин (при возможности материалцентрифугиру­ют при 10 000 об/мин).

Надосадочную жидкость обра­батываютэфиром  (к осветленной суспензиифекалыий добавляют 50 % по объемудиэтилового эфира, смесь оставляют вхолодильнике под ватно-марлевой пробкойв течение 12-16 часов)  и антибиотиками.

Ректальныетампоны помещают в пробирку с 1—2 млраствора Хенкса или Эрла, споласкивают,отжимают. Материал центрифугируют иобрабатывают эфиром и антибиотиками.

Глоточныйсмыв в объеме 20 мл получают при 2-кратном(с интервалом 3 мин) полоскании горластерильным солевым раствором илидистиллированной водой. Тампонамипротирают заднюю стенку глотки, миндалиныи небные дужки и погружают в пробиркус 1—2 мл раствора Хенкса. Материалцентрифугируют и обрабатывают эфироми антибиотиками.

Стерильнуюпрозрачную спинномозговую жидкость(около 3 мл) используют для выделениявируса без предварительной обработки.Мутную спинномозговую жидкость, а такжесодержащую эритроциты центрифу­гируют.Мочу в объеме 10 мл берут в стерильныйсосуд в середине акта мочеиспусканияи обрабатывают анти­биотиками.

Пробысекционного материала растирают встериль­ной ступке, готовят 20 % суспензиюв растворе Хенкса, центрифугируют 5—10мин при 2000 об/мин.

Материалобрабатывают  антибиотиками —пенициллином (1000 ЕД/мл) и стрептомицином(500 ЕД/мл) в течение 2 ч при комнатнойтемпературе, а затем используют его длявыделения вируса. Часть материалазамораживают и хранят при температуре—70 °С. Мно­гократное замораживаниеи оттаивание недопустимо, так какприводит к инактивации вируса.

Экспресс-диагностика ненашла широкого примене­ния приэнтеровирусных инфекциях из-заособенностей их патогенеза. Описаноприменение РИФ дляисследова­ния клеток спинномозговойжидкости. При ротавирусных инфекцияхприменяют ЭМ и ИЭМ (см.с. 243).

Выделениевируса проводятв культурах клеток и на однодневныхбелых мышах (табл.).

Таблица.Методы выделения и идентификацииэнтеровирусов

Вид исследова­ния

Цель исследо­вания

Материал

Живая система для заражения

Культивируемый энтеровирус

Способ идентификации

Вирусологическое

Выделение и идентификация вируса

Клинический    материал:

фекалии (ректальные тампоны),  смывы  с носовой части  глотки  (тампоны), спинно-мозговая        жидкость,   кровь,   содержимое везикул, моча, асцитическая жидкость

Первичные   культуры

клеток почек обезьян,

фибробластов эмбриона  человека,  переви-

ваемые культуры клеток Vero, Hela, Hep-2, KB и др.

Полиовирусы   1-        3-го типов,

Коксаки В 1-6-го   типов,    вирусы

ECHO, Коксаки А

(непостоянно)

РН  со   смесями поливалентных сывороток   в

культурах  клеток и на мышах-сосунках;     типовая   принадлеж-ность вируса в РН с моновалентной  сывороткой; РПГ,

РИФ, РСК

Секционный материал:

кровь,      спинномоз-говая жидкость, кусочки спинного,        продолговатого

мозга,  варолиева  моста, кусочки     и  содержимое кишок

Культура клеток

Вирусы  Коксаки А и

другие энтеровирусы

РПГ с эритроцитами человека 0 (I) группы крови, некоторые типы  энтеровирусов   (непостоянно)

При  подозрении  на   инфекции, вызванные ECHO и Коксаки — кусочки внутренних органов,  печени, селезенки, легкого,

миокарда, лимфати-ческие узлы

Однодневные    мыши-сосунки

Вирусы        Коксаки

групп А и В

Данные патоморфологического исследования

Полиовирусы(1—3-й), большинство вирусов КоксакиВ, ECHO,некоторые типы вирусов Коксаки А (7-й,9-й, 14-й, 16-й, 21-й) при размножении в культуреклеток по­чек обезьян оказывают ЦПД.

В культуре клеток почек эмбрионачеловека, амниона человека, диплоидныхклет­ках WI-38репродуцируются вирусы Коксаки А (11-й,13-й, 15-й, 18-й, 20-й, 21-й, 24-й), ECHO (21-й,34-й).

Боль­шинство серотипов КоксакиА размножаются и вызыва­ют ЦПД вкультуре клеток RD (культураиз рабдомиосаркомы человека). Длявыделения вирусов Коксаки параллельнос культурами клеток заражают новорож­денныхмышей.

ВирусыКоксаки А из материала от больныхнаиболее успешно удается выделитьтолько на однодневных мы­шах-сосунках,так как они не размножаются в большин­ствекультур клеток обезьян и человека.

Мышей-сосунковзаражают в мозг (0,01 мл), под­кожно (0,03мл), внутрибрюшинно (0,05 мл) иликом­бинированным методом,. Заинокулированными живот­ными наблюдают14 дней. При развитии клинических симптомовиз мозга больных животных и тушек готовят20 % суспензию для дальнейшего пассированиявируса. Берут также кусочки тканей длягистологического иссле­дования.

Индикациюэнтеровирусов проводят по ЦПД ибляшкообразованию под агаровым илибентонитовым  покрытиями, в культуреклеток, развитию пара­личей умышей-сосунков и их гибели, а также пофизи­ко-химическим свойствам: небольшиеразмеры, резистент-ность к жирорастворителями низким значениям рН (3,0), термостабильностьпри температуре 50 °С в при­сутствии 1М MgCl2 (магнияхлорида).

Дляидентификации энтеровирусов применяютРН, РТГА, РСК, РПГ, РИФ с типоспецифическимииммун­ными сыворотками.

РН проводятв культуре клеток или на мышах-сосун­кахпо общепринятой методике.

Идентификациюштаммов вирусов Коксаки А. В и ECHO,обладающих гемагглютинирующимисвойствами, осуществляют с помощью РТГА сиспользованием анти­генов из зараженныхклеточных культур и 1 % взвеси эритроцитовчеловека группы 0(І).

Для РСК вместоантисывороток применяют иммун­нуюасцитическую жидкость мышей, обладающуюмень­шей антикомплементарностью.

РПГ даетхорошие результаты с антигеном,концент­рированным в 200—400 раз.

Дляконцентрации энтеровирусов применяетсябентонитовый ме­тод. К 500 мл культуральнойвируссодержащей жидкости добав­ляют0,05—0,1 % геля бентонита по сухому весусорбента, рН сме­си доводят до 3,5—4,00,1 N раствором НС1. Смесь встряхивают 3—5мин, центрифугируют при 2000—3000 об/мин втечение 10— 15 мин.

Осадок (вирус-бентонит)отмывают 20—40 мл дистиллиро­ваннойводы. Элюцию вируса осуществляют 0,05М раствором трис-буфера (рН 9,0) приинтенсивном встряхивании в течение 4—5 мин. После этого смесь центрифугируюти исследуют надосадочную жидкость, вкоторой находится вирус.

Этот методпозволяет сконцентрировать вирус в100—200 раз.

Длясерологической диагностики применяютРН, РСК, РТГА. Диагностическое значениеимеет 4-кратное и более увеличение титраантител. Результаты сероло­гическогоисследования необходимо сопоставитьс виру­сологическими, эпидемиологическимии клиническими данными.

Дляпроведения РН смешивают100 доз вируса с 2-кратными разведеннымисыворотками больного. При проведении РН вкультурах клеток результаты учиты­ваютна 3—4-й и 7—8-й день, на мышах-сосунках— на 10—14-й день.

РСК используютдля диагностики полиомиелита.Диагностическое значение имеет выявлениеантител в титре 1 : 32 и выше, а такжеувеличение титра антител в 4 раза иболее. Лучшие результаты дают непрогретые(малореактивные) антигены, полученныепутем одно­кратного замораживания иоттаивания инфицированных клеток посленаступления полной специфическойдест­рукции.

РТГА длясерологической диагностики энтеровирусныхинфекций применяется редко.Гемагглютинирующий антиген получаютпри высоком титре вируса (106—107 ЦПД50/МЛ). Сывороткибольных обрабатывают для удаленияспонтанных гемагглютининов инеспецифиче­ских ингибиторовгемагглютинации.

Источник: https://studfile.net/preview/3299032/page:5/

Советы доктора
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: