Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Содержание
  1. Пцр на туберкулез: диагностика, сколько стоит анализ крови, мочи, мокроты, тест на микобактерии у детей, вместо манту ребенку
  2. В каких случаях необходим пцр
  3. Противопоказания к методу
  4. Преимущества и недостатки анализа
  5. Виды анализа
  6. Кровь
  7. Слюна
  8. Мокрота
  9. Моча
  10. Подготовка к процедуре
  11. Как производится забор крови
  12. Расшифровка результатов
  13. Сколько стоит анализ
  14. Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняется
  15. Как проводится
  16. Сходства и различия тестов на туберкулез
  17. Значение результатов теста
  18. Диаскинтест
  19. Пцр диагностика туберкулеза – суть метода, плюсы и минусы
  20. Суть метода
  21. ПЦР-исследование туберкулеза
  22. Показания для проведения ПЦР-исследования туберкулеза
  23. Забор материала
  24. Требования к ПЦР-лаборатории
  25. Плюсы ПЦР-диагностики
  26. Минусы ПЦР-диагностики
  27. Где пройти ПЦР-исследование на туберкулез
  28. Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро и Диаскинтест: преимущества и отличия
  29. Диаскинтест на туберкулез
  30. Заменяет ли Диаскин пробу Манту?
  31. Квантифероновый тест на туберкулез
  32. Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) соскоб, кач
  33. Результаты исследования

Пцр на туберкулез: диагностика, сколько стоит анализ крови, мочи, мокроты, тест на микобактерии у детей, вместо манту ребенку

Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Одним их эффективных диагностических методов является метод ПЦР на туберкулез (полимеразная цепная реакция). Анализ представляет собой метод обнаружения возбудителя при помощи ДНК и РНК в организме человека.

Анализ высокочастотный, поэтому позволяет выявить микроорганизмы, которые являются возбудителями болезни, даже если они находятся в малом количестве. Для этого достаточно наличия единичного клеточного элемента.

Анализ проводится при помощи полимеразы, специфического фермента.

В каких случаях необходим пцр

Туберкулез – распространенное заболевание инфекционного происхождения, возбудитель которого – палочка Коха. К основным симптомам патологии относится кашель с выделением мокроты в течение длительного периода, кровохарканье, которое присоединяется на более поздних стадиях болезни, повышенная температура тела, постоянная слабость, потливость в ночное время, резкое похудение.

Туберкулез может поражать не только легкие, но и головной мозг, систему пищеварения, суставы, позвоночник, кожные покровы, мочеполовую систему. Болеют как взрослые, так и дети. Каждый год заболевают около 10 млн человек, из которых около 2 млн погибают. Патология передается воздушно-капельным путем, через органы пищеварения, быстро образует устойчивость ко многим медикаментозным средствам.

Важным моментом в лечении инфекции является вовремя обнаруженная болезнь.

Метод ПЦР для выявления туберкулеза полностью безопасный и применяется без ограничений. Проводится по направлению от фтизиатра, педиатра, терапевта или пульмонолога. В некоторых ситуациях ПЦР является единственным диагностическим методом, часто назначается:

  • при беременности, т.к. во время вынашивания ребенка рентгенологическое и флюорографическое исследования противопоказаны;
  • при контакте с источником инфекции;
  • при аллергической реакции;
  • при ВИЧ-инфекции;
  • при затрудненной постановке диагноза в случае болезней легких;
  • при обследовании перед проведением оперативных вмешательств;
  • в детском возрасте.

Другие методы также продолжают применяться в случаях, когда нет возможности провести ПЦР, – это туберкулинодиагностика или Манту, флюорографическое исследование, рентгенография легких. Данные обследования бесплатные, в отличие от ПЦР, но имеют свои недостатки.

ПЦР диагностика туберкулеза у детей – менее вредная процедура, чем рентген, при котором ребенок получит лишнюю и не нужную дозу облучения. Тест на туберкулез может вызвать проявление аллергической реакции у ребенка. Бактериологический анализ долго исследуется, результата можно ждать только через месяц. Поэтому при возможности проведения ПЦР ребенку лучше использовать его.

Противопоказания к методу

Противопоказаний для данного вида диагностики практически нет, можно использовать при простудных и других заболеваниях. Не рекомендуется проводить исследование сразу после прививки и курса противотуберкулезной терапии, т.к. остаточные микроорганизмы могут находиться некоторое время в крови и влияют на диагностику туберкулеза.

Преимущества и недостатки анализа

Диагностика туберкулеза данным методом – распространенная процедура, она имеет ряд преимуществ:

  • Высокая точность исследования, позволяющая высеять микобактерии в малых количествах.
  • Выявляет заболевание на самых ранних стадиях, еще до возникновения симптоматики.
  • С помощью этого метода получается с первого раза выявить возбудителя.
  • Все исследование (с получением результата) занимает не более 5 часов. При этом посев необходимо ждать несколько недель. Это особенно важно перед проведением оперативных вмешательств, в случае необходимости быстрой диагностики на наличие заболевания.
  • Метод эффективен при диагностике рецидива заболевания.
  • Для исследования применяется жидкий биологический материал.
  • Для проведения диагностики туберкулеза в легких более достоверную диагностическую информацию дает мокрота, при менингите туберкулезного происхождения исследуются участки спинного мозга.
  • Кровь помогает обнаружить местный очаг инфицирования, проверить степень чувствительности возбудителя к антибактериальной терапии, а при помощи этого назначается эффективное и правильное лечение.
  • Может использоваться вместо флюорографического и рентгенологического исследований, которые запрещены для проведения детям младшего возраста. При необходимости можно назначать исследование ПЦР на туберкулез вместо Манту.

Недостатки:

  • Главный – это достаточно высокая цена, поскольку для проведения исследования применяется дорогое современное оборудование. За счет этого в основном используется как метод дополнительной диагностики наряду с другими исследованиями.
  • Невозможность провести ПЦР сразу после курса лечения из за остаточных бактерий.
  • В некоторых случаях в результате мутирования бактерий – возбудителей заболевания – результат анализа может быть ложноположительным.

Виды анализа

Выбор того или иного биологического материала на исследование туберкулеза назначается индивидуально, это может быть кровь, мазок слюны, мокрота, моча.

Кровь

Анализ крови на туберкулез назначают в случае невозможности проведения других исследований.

Кроме того, он более безвреден для тех людей, которым рентгенографическое обследование способно принести вред.

Для того чтобы увидеть полную картину, иногда требуется сделать несколько снимков, а это лишнее облучение организма. Кровь может исследоваться и при получении сомнительных результатов флюорографии.

Слюна

Анализ ПЦР на туберкулез слюны не такой информативный, как исследование крови, потому что туберкулезная инфекция не действует на слюнные железы. В результате ответ почти всегда отрицательный.

Тем не менее ПЦР-тест слюны может выявить легочные и внелегочные формы протекания заболевания.
В случае если при воздействии реагента цветовая гамма исследуемого образца не поменялась, микобактерии туберкулеза не обнаружены. При сомнительном результате проводится ряд дополнительных обследований.

Мокрота

Анализ мокроты на туберкулез берется на исследование 3 раза во избежание неточного результата. При начальной стадии инфицирования мокрота будет выделяться в малом количестве, при запущенной патологии будут присутствовать кровянистые включения.

При подозрении на туберкулез костей или нервной системы данное исследование информативным не будет.

Моча

Анализ мочи помогает выявить туберкулез внелегочной формы – мочеполовых органов. При поражении легких данное исследование не информативно.

Сдача ПЦР мочи на туберкулез требует подготовки. Накануне процедуры нужно исключить прием лекарственных препаратов, сексуальные контакты. Брать материал следует в утренние часы, стараться за несколько дней до проведения процедуры не употреблять в пищу продукты, которые могут окрасить мочу в различные цвета.

Подготовка к процедуре

Во избежание получения ложного или не информативного результата рекомендовано придерживаться следующих правил:

  • Перед ПЦР-анализом на туберкулез в течение 8 часов воздержаться от приема пищи.
  • Не употреблять алкоголь и не курить в течение 6 часов перед процедурой.
  • Перед исследованием не принимать лекарственные препараты.
  • Мокроту собирать утром после чистки зубов и полоскания ротовой полости кипяченой водой.
  • При небольшом количестве выделяемого экссудата накануне выпить препарат с отхаркивающим действием или провести ингаляцию. Наиболее информативная мокрота та, в которой присутствуют слизь, гной с белыми или желтоватыми вкраплениями.

При невозможности взятия мокроты на исследование применяют смыв из области бронхов, он не требует специальной подготовки. Проводится путем вливания пациенту в трахею раствора натрия хлорида, который провоцирует кашель с жидкостью. Она и используется для дальнейшего исследования.

Повлиять на точность результата могут некоторые лекарственные препараты, особенно антибиотики и гепарин. По этой причине за 3 дня до проведения процедуры следует исключить их применение.

Как производится забор крови

Процедура проходит с использованием амплификатора, исследование состоит из 4 этапов. Для анализа берутся участки ДНК, в которых начинается процесс синтезирования молекул, нуклеотидов, полимеразанов. Образцы прогреваются до температуры 98°С для того, чтобы разрушилась первичная структура ДНК-цепочки.

Затем праймер связывается с нитью ДНК при помощи отжига и снижения температуры на несколько градусов.

После 25-30 идентичных циклов образуется некоторое число копий ДНК вирусов, по которым уже и определяется возбудитель болезни. Этот анализ может заменять Манту ребенку. Результат исследования может быть положительным в течение некоторого времени, т. к. анализ ПЦР не идентифицирует мертвые микобактерии от живых.

Расшифровка результатов

Срок проведения исследования на ПЦР при туберкулезе составляет 6-7 часов.
Может быть 2 варианта ответа:

  • Обнаружено – в исследуемом материале нашли ДНК микобактерии туберкулеза. Возможность заражения – примерно 98%. При таком результате доктором проводится развернутая расшифровка анализа, которая определяет стадию протекания заболевания и ее очаговое расположение. Таких пациентов немедленно отправляют в противотуберкулезный диспансер для проведения лечения.
  • Не обнаружено – возбудитель заболевания отсутствует.

Сколько стоит анализ

Анализ крови ПЦР на туберкулез стоит от 240 до 365 руб., цена зависит от города. Самый дорогостоящий анализ в Москве, в остальных регионах цена на исследование примерно одинаковая.

Источник: https://ProTuberkulez.info/diagnostika/ptsr.html

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро: что это такое и как выполняется

Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Квантифероновый тест, это такая процедура, которая дает возможность с высокой степенью точности обнаружить туберкулез даже на первоначальной стадии. Способ внедрен не так давно, в связи с чем его испытание в клинических условиях продолжается.

По мнению врачей фтизиатров, формальный отказ от туберкулинодиагностики и применение названного выше метода диагностики было плохим решением. Так как эффективная экономия от внедрения этой процедуры стала важнее качества диагностики и здоровья пациента.

Несмотря на новую технологию, нельзя забывать про традиционные способы диагностики, дающие существенный эффект последнюю половину века. При их содействии получилось снизить смертность и процент заболеваемости.

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро был создан как альтернатива для туберкулинодиагностики. Однако не опробован в клинических условиях. Только по результатам обследований можно признать высокую точность диагностики процедуры.

Основа квантиферонового теста состоит в установлении гамма-интерферона, высвобождаемого Т-лимфоцитами во время встречи с микобактерией туберкулеза.

Инвитро устанавливают специфичные белки, имеющиеся в составе микобактерии человеческого туберкулеза и бычьего. С их поддержкой создаются специальные антитела.

Обнаружение протеинов при содействии квантиферонового теста считается качественным показателем присутствия палочки Коха в теле человека.

При проведении процедуры также возможно обнаружение микобактериоза. Если результат диагностики положительный, то следует выполнить дифференцированное диагностирование между микобактериозом и возбудителем туберкулеза.

Как проводится

Тестирование обнаруживает наличие гамма-интерферона к протеинам. Итоговый результат устанавливается впоследствии оценки проверок с двух пробирок.

При практическом использовании квантиферонового тестирования медиками было установлено, что треть от всего народонаселения заражена микобактериями. Но лишь у 10% болезнь начинает развиваться. Неблагоприятные условия для жизни активизируют инфекцию при условии наличия слабой иммунной защитой.

В категорию высокого риска к положительному квантифероновому тесту относят:

  • работа в противотуберкулезном учреждении;
  • выходцы исправительных учреждений;
  • носители ВИЧ-инфекции;
  • граждан с сахарным диабетом;
  • проживание с больными.

Квантифероновое обследование проводится при отсутствии возможности выполнить Диаскинтест и пробы Манту, в ситуациях:

  1. при острых и соматических расстройствах, при обострении хронических заболеваний
  2. при непереносимости туберкулина
  3. при аллергических, дерматологических заболеваниях в период обострения
  4. во время карантина в организациях, которые посещает ребенок.

Ложный положительный результат пробы Манту может встречаться у человека, имеющего индивидуальную непереносимость туберкулина. Подобная характерная черта туберкулинового теста стала главной причиной отказаться от пробы.

Сходства и различия тестов на туберкулез

Сходные и отличительные черты тестов на туберкулез: Манту, квантифероновый тест, диаскинтест

  • тестирование Манту и Диаскинтест являются дерматологическими пробами, а квантифероновое обследование выполняется при заборе крови.
  • выполнение квантиферонового теста не имеет побочных эффектов
  • к туберкулинодиагностике и диаскинтесту имеются противопоказания
  • квантифероновый и диаскинтест имеют большую специфику
  • при проведении пробы Манту может встречаться ложный результат

Зависимость от времени выполнения профилактической прививки у квантиферонового тестирования отсутствует, прочие процедуры выполняются спустя месяц после БЦЖ. Беспристрастное интерпретирование результатов возможно лишь при квантифероновом тесте.

Из этого следует ряд плюсов квантиферонового теста:

  1. отсутствие ложных положительных результатов
  2. нет ограничений и противопоказаний
  3. отсутствие побочных реакций
  4. безвредность
  5. большая чувствительность и специфика.

Показания для выполнения квантиферонового теста:

  • контактирование с больным туберкулезом
  • высокая опасность контакта с возбудителем
  • положительный результат пробы Манту
  • противопоказания к проведению диаскинтеста и туберкулинодиагностики
  • обследование мигрантов.

Значение результатов теста

При квантифероновом тестировании не проводится разделения между активным и скрытым туберкулезом.

При положительном результате необходим прием у фтизиатра, который установит последующий план лечения больного.

Если установленный уровень гамма интерферона не говорит о наличии инфицирования, возможен риск скрытой фазы болезни, в этом случае необходимо вести динамическое наблюдение за пациентом.

Отрицательный результат сообщает об отсутствии инфекции в теле. Если результат положительный, то возможность присутствия болезни имеется. Если результат сомнительный. то можно предполагать чувствительность к ТВ-антигену.

Что означает положительное значение квантиферонового теста:

  • Инфицирование нетуберкулезными бактериями
  • Присутствие микобактерий туберкулеза в теле
  • Оценка при спорном значении теста
  • Плохая преаналитическая подготовленность
  • Персональная особенность иммунитета.

Если получены вышеназванные результаты, выполняется новый забор крови.

Что означает отрицательный показатель теста:

  • иммунодефицит
  • ранняя стадия заражения
  • невыполнение правил преаналитики
  • возраст до 5 лет

Отрицательный результат не гарантирует полное исключение заражения туберкулезом.

Оценивание итогов теста выполняется учитывая клинико-эпидемиологическую картину и прочие анамнестические свойства лица.

Диаскинтест

Новый тест на туберкулез, названный диаскинтестом пришел на смену стандартной туберкулинодиагностике.

Основой методики стало подкожное введение определенного количества белка, являющегося специфичным для туберкулезных микобактерий. Положительные значения говорят о том, что пациент имеет инфекцию в активной или скрытой стадии.

Отрицательный показатель не гарантирует отсутствие инфекции. При выраженном иммунитете против туберкулезной микобактерии характерна негативная проба.

Однако медицинские результаты диаскинтеста считаются более точными и универсальными по сравнению с пробой Манту.

Новая методика диагностирования устанавливает тубинфицированность и основана на раскрытии ответа индивидуума на присутствие микобактерии. Исследование разработано в России и демонстрирует высокую точность.

Преимущества диаскинтеста:

  • В растворе содержатся видоспецифичные белки.
  • Высокая чувствительность.
  • Результаты более точные
  • Применяется при динамическом наблюдении за ходом лечения

Различие в составе препаратов теста Манту и диаскинтеста предполагает разные клинические показатели обоих тестов.

Во время введения туберкулина возникают ложноположительные реакции, вызванные введением немалого числа чужеродного антигена. Диаскинтест дает положительный результат, если тело человека ранее имело дело с туберкулезными антигенами.

Если проба Манту дала положительный эффект, то требуется профилактическая терапия, а это не всегда является разумным решением.

Источник: https://lor.guru/preparaty/kapli/interferon/kvantiferonovyy-test-na-tuberkulez-v-invitro.html

Пцр диагностика туберкулеза – суть метода, плюсы и минусы

Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

Суть метода

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

  • Кровь.
  • Слюна.
  • Мокрота.
  • Выделения из половых органов.
  • Смывная жидкость бронхов.
  • Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

  1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
  2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
  3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-исследование туберкулеза

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

Показания для проведения ПЦР-исследования туберкулеза

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

  • Длительный контакт с больным туберкулезом.
  • Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
  • Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
  • Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
  • ВИЧ-инфекция.
  • Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
  • Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

  • Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
  • Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
  • Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
  • Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
  • Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
  • Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Требования к ПЦР-лаборатории

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

  • Зона приемки и сортировки проб.
  • Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
  • Зона проведения реакционных проб.
  • Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

Плюсы ПЦР-диагностики

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

  • Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
  • Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
  • ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
  • С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
  • Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
  • Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
  • Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
  • ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
  • Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы ПЦР-диагностики

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

  • Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
  • Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
  • При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
  • Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
  • Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

Где пройти ПЦР-исследование на туберкулез

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

Источник: http://tuberculosis.su/pcr-diagnostika.html

Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро и Диаскинтест: преимущества и отличия

Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Если у человека появляются симптомы такого опасного и трудноизлечимого заболевания, как туберкулез, необходимо срочно обратиться в диспансер для проведения диагностических исследований организма.

Не менее важно регулярно обследоваться в тубдиспансере тем людям, которые контактировали или постоянно ухаживают за больным с открытой формой туберкулеза.

Кроме того, после посещения страны, где уровень заболеваемости и заражением микобактериями очень высок, следует сразу же сдать соответствующие анализы на выявление возбудителя в организме.

В настоящее время диагностировать туберкулез легких или других органов можно различными способами.

Но самый первый тест – это туберкулиновая проба Манту, которая за пару дней позволяет определить, инфицирован ли человек микобактериями или нет.

Также с недавних пор начали использовать другие виды тестирования: Диаскинтест и Квантифероновое исследование в Инвитро. Рассмотрим, как они проводятся и в чем их преимущества перед пробой Манту.

Диаскинтест на туберкулез

В отличие от туберкулиновой пробы, которая реагирует на прививку БЦЖ и живую инфекцию микобактерий, вещество Диаскин показывает исключительное заражение, а не аллергическую реакцию на проведенную вакцинацию. Поэтому Диаскинтест необходимо проводить в тех случаях, когда после Манту нужно отделить поствакцинальную аллергию от наличия истинного возбудителя туберкулеза.

Диаскин является новым аллергендиагностическим препаратом, который улучшает качество исследования организма туберкулезной инфекции.

В средстве содержатся антитела, которые присутствуют в болезнетворных штаммах микобактерий, но отсутствуют в вакцине БЦЖ. Благодаря этому аллергическая реакция Диаскинтеста возникает только при наличии истинной инфекции.

Но в препарате не содержится возбудителей туберкулеза, поэтому заразится заболеванием после аллергопробы невозможно.

Если сравнивать пробу Манту и Диаскинтест, то в первом случае выявить микобактерии получается лишь в 50-70% случаев. А вторая аллергопроба более точная, так как находит возбудителя туберкулеза в 90%. Нельзя сказать, что препарат Диаскин заменит туберкулиновую пробу, поскольку с его помощью невозможно определить, необходима ли пациенту ревакцинация БЦЖ или нет.

Диаскинтест назначают в следующих ситуациях:

  • Когда нужно диагностировать туберкулез и выявить уровень активности воспалительного процесса;
  • Отличить заражение микобактериями от симптомов других заболеваний, с похожими проявлениями;
  • Дифференцировать аллергическую реакцию на БЦЖ от воспаления на истинного возбудителя;
  • Наблюдать за процессом лечения и его эффективностью.

Диаскинтест на туберкулез обязательно проводится в тех случаях, когда у детей или взрослых пациентов присутствует вираж пробы Манту. Но он противопоказан пациентам с такими заболеваниями:

  • Острые воспаления или обострения хронических болезней (исключением являются симптомы, которые похожи на развитие туберкулеза);
  • Соматические расстройства;
  • Кожные заболевания;
  • Аллергия;
  • Эпилептические припадки.

После того как острые воспалительные процессы проходят, тогда Диаскинтест проводить не противопоказано.

Вводят Диаскин таким же образом, как и пробу Манту. Но оба теста не совмещают в один период. То есть, если туберкулиновую реакцию проводят по календарю, то Диаскинтест переносят на следующий месяц после прививки. Когда Манту вводят в одно предплечье, для инъекции Диаскина обязательно используют другое.

Результат Диаскинтеста оценивают через три сутки. Если на месте введения препарата отсутствует покраснение и инфильтрат, то тест отрицательный. Как только на коже образуется папула любого размера и присутствует гиперемия, проба положительная. Реакция на Диаскинтест будет отсутствовать у здоровых пациентов, вылечившихся от туберкулеза и инфицированных неактивной микобактерией.

Заменяет ли Диаскин пробу Манту?

Диаскинтест является хорошей туберкулезной пробой, но один он не может быть полностью информативным. С его помощью удается выделить большую часть больных с легочной формой заболевания человечьей палочкой Коха. Но при других видах микобактерий проба не сможет выявить возбудителя туберкулеза.

Важно отметить, что сила реакции организма на Диаскин не может говорить о выраженности или уровне активности палочки, поскольку кожная аллергия больше отмечает ответ иммунной системы на введенные антитела.

Кроме того, Диаскинтест обычно не диагностирует вторичное инфицирование туберкулеза, которое, как правило, вызвано бычьим штаммом микобактерий.

Поэтому даже при резкой реакции пробы Манту ребенка или взрослого человека уже направляют на лечение от туберкулеза, даже если у него отсутствует кашель.

Хоть в этом случае Диаскинтест может быть отрицательным, первая туберкулиновая реакция требует особого внимания.

В настоящее время выделяют три клинических формы туберкулеза:

  1. Легочная;
  2. Внелегочная;
  3. Воспалительная.

В зависимости от вида поражения каждый тест будет реагировать по-своему.

При введении инъекции Манту все три формы туберкулеза вызовут положительную реакцию организма пациента. Если проводить Диаскинтест, то при легочном заболевании он обычно положительный, а при двух других формах – отрицателен.

Из этого можно сделать вывод, что Манту укажет на микобактерии, поражающие любые органы человека, даже если они находятся в неактивном состоянии. А Диаскин выявит истинную человеческую палочку туберкулеза среди больных легочными формами.

Диаскинтест не заменяет пробу Манту, он может стать лишь ее дополнением.

Квантифероновый тест на туберкулез

За последние годы очень часто вместе с пробой Манту рекомендовано  использовать тест для выявления больных, зараженных туберкулезной инфекцией разных видов. Квантифероновый тест проводится вне организма, поэтому является полностью безопасным для людей с ослабленным иммунитетом.

Анализ крови определяет наличие гамма-интерферона, который продуцируется только у заболевших туберкулезом. Чтобы провести исследование, у пациента берут венозную кровь. Перед сдачей анализов человек не должен принимать пищу в течение восьми часов. Забранный образец помещают в три пробирки, чтобы исключить ложные результаты исследования.

Если сравнивать Квантифероновый тест с Манту или Диаскинтестом, то он более чувствителен и помогает точно выявить наличие туберкулезной инфекции. Но при этом, он также не реагирует на вакцину БЦЖ и дает отрицательный результат.

К преимуществам определения гамма-интерферонов относят:

  • Высокую чувствительность теста;
  • Безопасность, отсутствие побочных действий;
  • Не реагирование на БЦЖ;
  • Нет противопоказаний;
  • Объективность оценки результатов теста.

К недостаткам Квантиферонового исследования можно отнести то, что оно не позволяет определить, есть ли в организме человека латентная форма туберкулеза или активное воспаление.

Важно отметить, что тест в Инвитро дает возможность заменить туберкулинодиагностику. Но в настоящее время точность Квантиферонового результата доказана лишь в лабораторных исследованиях, но не проверена на практике.

Инвитро определяются гамма-интерфероны, которые вырабатываются в организме Т-лимфоцитами лишь после встречи с туберкулезным возбудителем. Специфические белки выделяются при контакте, как с человеческим видом микобактерий, так и с бычьим.

После того как иммунные клетки распознают туберкулезную палочку, они вырабатывают антитела, определяющиеся при исследовании венозной крови. Таким образом, Квантифероновый тест выявляет даже микобактериозы.

Поэтому при положительном результате диагностики следует отличить наличие возбудителя туберкулеза от микобактериозов.

Проведенные обследования разных пациентов дали понять, что третья часть всего населения инфицирована микобактериями. Но только у 6% людей может развиться туберкулез. Чаще всего его провоцируют внешние неблагоприятные факторы или ослабленный иммунитет.

В группу риска входят люди:

  • Контактирующие с пациентами с открытой формой туберкулеза (родственники, медработники);
  • ВИЧ-инфицированные;
  • Болеющие диабетом;
  • Освобожденные из исправительных колоний.

Квантифероновый тест в Инвитро рекомендован тем лицам, которым противопоказано делать Манту или Диаскинтест.

Например, если у человека отмечаются острые или рецидивирующие заболевания, то вводить туберкулиновое вещество категорически запрещено. Также в период карантина детям не делают кожные пробы.

У некоторых людей есть аллергия на туберкулин, поэтому им не подходит данный вид исследования на инфицирование туберкулезом.

Чтобы сравнить преимущества Квантиферонового теста с пробой Манту или Диаскинтестом, необходимо ознакомиться с некоторыми особенностями диагностики.

Квантифероновый тестМанту, Диаскинтест
Для исследования не нужно вводить инъекцию под кожу, потому что используется венозная кровь пациента.Проба требует подкожной инъекции, поэтому не разрешена при ослабленном иммунитете человека.
Не отмечается побочных реакций, так как нет контакта с организмом.Бывают негативные воздействия, особенно, если у больного наблюдается непереносимость введенного вещества.
Не бывает противопоказаний, поскольку тест проводится в Инвитро.При обострениях заболеваний или тяжелых хронических патологиях производить исследования туберкулиновой пробой запрещено.
Нет реакции на вакцинацию БЦЖ.У Манту аллергическая реакция возникает не только на инфекцию, но и на антитела после прививок БЦЖ. У Диаскинтеста ложноположительных ответов на поствакцинацию не бывает.

Источник: https://diagnos-med.ru/kvantiferonovyj-test-na-tuberkulez-v-invitro-i-diaskintest-preimushhestva-i-otlichiya/

Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) соскоб, кач

Инвитро тест на микобактерии туберкулеза что это

Исследование проводят в целях диагностики туберкулеза легких. Методом полимеразной цепной реакции ПЦР в соскобе из зева устанавливают наличие генетического материала Mycobacterium tuberculosis.

Исследование направлено на диагностику туберкулёза дыхательных путей – мультисистемного заболевания с множеством проявлений, которое является наиболее распространенной причиной смертности от инфекционных заболеваний во всем мире. По данным ВОЗ, в 2015 году было зафиксировано 1,4 млн случаев смерти от туберкулёза, среди которых 0,4 млн человек имели ВИЧ.

Россия входит в число стран с наиболее высоким показателем распространенности туберкулеза, хотя в последние 10 лет в этом направлении наблюдается положительная тенденция: снижается число как новых случаев заражения, так и доля носителей из общего числа больных.

Как правило, данное заболевание поражает легкие (85% случаев), но может затрагивать и другие органы, в том числе кости.  Источниками инфицирования являются больные люди с открытой формой заболевания (выделяющие возбудителя в окружающую среду со слюной). Симптомами заболевания являются:

  • Потеря веса/ анорексия
  • Потеря аппетита
  • Обильная потливость в ночное время.
  • Высокая температура
  • Общая слабость

Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:

  • Кашель 
  • Кровохарканье (кашель с кровью)
  • Боль в груди

При внелегочной форме симптомы будут зависеть от области поражения. Mycobacterium tuberculosis complex — общее название близкородственных бактерий, которые являются возбудителями туберкулёза. Они имеют множество факторов патогенности, которые позволяют им долго выживать в окружающей среде и избегать иммунного ответа. Микобактерия туберкулеза является внтуриклеточным паразитом, тем самым, будучи поглощенной клетками иммунной системы возбудитель инактивирует ферменты данных клеток, тем самым оставаясь жизнеспособной. Благодаря этим свойствам микобактерий, туберкулёз – достаточно опасное заболевание, особенно для людей с ослабленным иммунитетом. Заражение происходит, как правило, воздушно-капельным путем, когда инфицированный человек чихает или кашляет, в редких случаях для заражения достаточно даже разговора с больным Также Туберкулез может передаться даже от беременной женщины плоду еще в утробе.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве.  ПЦР на M.

Tuberculosis, согласно международным клиническим рекомендациям, не является стандартом диагностики данного заболевания. Данные тест используется в качестве дополнительного.

“Золотой стандарт”: Проба Манту, T-SPOT, диаскин или квантифероновый тест.

  • Диагностика туберкулёза дыхательной системы.
  • Контроль эффективности лечения.
  • Раннее выявление обострения туберкулёза при хроническом течении.

Противопоказания и ограничения Абсолютных противопоказаний нет. На результаты исследования может влиять:

  • Приём пищи менее чем за 2 часа до проведения исследования;
  • Лечение антибиотиками менее, чем за 2 недели до взятия материала.

Мазок из зева на анализ возьмет сотрудник лаборатории. От вас требуется только ответственная подготовка:

  1. Если вы принимали антибактериальные препараты, мазок из зева можно сдавать не раньше, чем через 2 недели после последнего приема лекарства.
  2. В течение 5 дней перед взятием мазка не используйте антисептические препараты (хлоргексидин, мирамистин) в виде спреев и не полощите ими полость рта и горло. Это приведет к нарушению состава микрофлоры и не даст выявить возбудителя заболевания, исказив результаты исследования.
  3. Непосредственно в день взятия мазка недопустимо чистить зубы и полоскать горло.
  4. За 3 часа до взятия мазка нельзя ни пить, ни есть.

Материал для исследования
Соскоб из зева.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Формат представления результатов, единицы измерения [и анализатор по возможности]

Качественный

Аналитические показатели

100 копий в пробе

Результаты исследования

Референсные значения (нормы)

Причины отрицательного результата:

  • Отсутствие инфицирования Mycobacterium tuberculosis дыхательных путей;
  • Низкая концентрация возбудителя в биоматериале.
  • Причины положительного результата:
  • Наличиемикобактерии туберкулёза  в исследуемом биоматериале. Наблюдается при активной форме заболевания.

Использованная литература

  1. Общероссийская общественная организация «РОССИЙСКОЕ ОБЩЕСТВО ФТИЗИАТРОВ»: Федеральные клинические рекомендации по организации и проведению микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза — Москва, 2014.
  2. Приказ Министерства здравоохранения РФ от 29 декабря 2014 г. № 951 “Об утверждении методических рекомендаций по совершенствованию диагностики и лечения туберкулеза органов дыхания”
  3. С.Н. Скорняков (председатель), М.В. Шульгина (координатор), Б.М. Ариэль, Г.С. Баласанянц, Д. В.Вахрушева, А.В. Владимиров, В.Б. Галкин, Л.М.

    Гринберг, В.Ю. Журавлев, М.А. Кравченко, С.Ю. Красноборова, А.В. Мордык, Т.И. Петренко: Клинические рекомендации по этиологической диагностике туберкулеза — 2014.

  4. Национальная ассоциация фтизиатров: Клинические рекомендации по диагностике и лечению туберкулеза органов дыхания у взрослых — 2013.

  5. Аналитический обзор по туберкулёзу. 2011. М.,2003 http://www.mednet.ru/images/stories/files/CMT/tbreview2011.pdf
  6. WHO: The Stop TB Strategy https://www.who.int/tb/strategy/stop_tb_strategy/en/National Center for 
  7. National Center for HIV/AIDS, Viral Hepatitis, STD, and TB Prevention.

    Division of Tuberculosis Elimination.Tuberculosis Disease FactSheets. https://www.cdc.gov/tb/publications/factsheets/testing/diagnosis.htm

Источник: https://www.gemotest.ru/catalog/po-laboratornym-napravleniyam/diagnostika-infektsiy/ptsr-diagnostika/individualnaya-diagnostika-vozbuditeley/mikobakterii-tuberkuleza/mikobakterii-tuberkuleza-mazok-kach/

Советы доктора
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: